项目1：益中生血片（胶囊） 益中生血片（胶囊）是依据“脾为后天之本，气血生化之源”理论，通过临床实践研制的治疗确铁性贫血有显著疗效的中药新药，其治疗效果与现有铁剂疗效相似，但无不良反应。患者服药后能够明显改善面色萎黄，头目眩晕，心悸气短，食欲不振，脘腹胀满，大便不调等临床症状。近些年临床观察发现，该药能有效的防治化疗后骨髓抑制，对老年性贫血也有良好的治疗效果，其治疗机制是通过促进胃肠道对营养物质吸收而发挥作用。为增加该药物生物利用度，减少药物服用剂量（片剂每次6片，每日3次），对该产品进行了工艺改进，制备益中生血胶囊（胶囊每次2-4，每日3次。该产品片剂于1997年正式上市销售；胶囊于2005年正式上市销售。该项目研究曾获得北京中医药大学科研基金资助，新药产品获得教育部科技成果、北京市科技进步三等奖与北京中医药大学科技进步二等奖。 项目2：益髓颗粒剂治疗治疗骨髓增生异常综合征（改善骨髓巨核系病态造血）研究 “益髓颗粒剂治疗治疗骨髓增生异常综合征（改善骨髓巨核系病态造血）研究为国家自然科学基金会资助项目（批准号：39470863）。其相关研究也于1994年分别受到了中华人民共和国卫生部科研基金和高等学校博士点专项基金资助。该项研究从1990年开始分三阶段进行。①临床证候调研阶段：主要是对骨髓增生异常综合征（改善骨髓巨核系病态造血）中医临床证候调查，研究结果显示：该类疾病患者临床以“气阴两虚、血瘀内阻”证候为主要表现，依据该类疾病临床证候，我们拟定“益气养阴活血”法为治疗原则，经过一定时间临床探索后，通过临床确定一有效方剂“益髓灵（颗粒剂）”。②基础研究阶段：主要是益髓颗粒剂干预该类疾病的实验研究，试图通过实验研究证明益髓颗粒剂能否够抑制患者骨髓病态造血、促进巨核细胞增殖与促进分化，并为临床推广应用提供实验研究依据。研究结果显示：益髓颗粒剂能够有效的杀伤白血病细胞、诱导病态巨核细胞分化、促进病态巨核细胞凋亡、保护骨髓正常细胞的增殖，并能够调节细胞与体液免疫功能。③临床验证阶段：重点观察了医院制剂“益髓颗粒剂”治疗骨髓增生异常综合征（改善骨髓巨核系病态造血）临床疗效。研究结果显示：①益髓颗粒剂能够明显改善患者临床主症，缓解出血倾向；②能提高并稳定患者外周血象（小板数、白细胞与血红蛋白值）；③近期临床显效率55.8%(对照组33.3%)，总有效率80.8％（对照组66.6%），两组比较有统计学意义（P<0.01）；④能够明显降低白细胞转化率；⑤能够明显延长患者生存期。该项研究获教育部科技成果与北京中医药大学科技进步二等奖。医院制剂“益髓颗粒剂”销售量在所有医院制剂中居于第三位。 项目3：川芎嗪注射液干预白血病多药耐药基因与相关蛋白基因表达研究 该项研究为教育部优秀青年骨干教师基金资助项目。经过三年的能力，课题组已经按照计划书完成了研究任务。课题研究得到了专家委员会一致好评，综合评议如下：肿瘤细胞在实施化疗过程中可产生多药耐药，多药耐药性的发生是肿瘤化疗失败和复发主要原因之一。解决肿瘤多药耐药性是当前国内外研究的热点，也是提高肿瘤患者临床缓解率，延长生存期的关键。本项研究是在我校、卫生部课题研究中发现川芎嗪具有肿瘤细胞多药耐药逆转剂新用途。并在体外研究基础上，试图通过川芎嗪干预白血病多药耐药基因〔mdr1〕与多药耐药相关蛋白基因〔MRP〕表达研究，证实该药在人体内存在着逆转肿瘤细胞多药耐药生物活性。课题初步的实验研究表明，川芎嗪可以增加耐药白血病细胞内抗癌药物浓度，但并不增加正常细胞内抗癌药物浓度。课题首次将川芎嗪用于白血病多药耐药研究领域，并通过临床研究证实，川芎嗪对耐药白血病具有一定临床疗效，这为川芎嗪扩大临床适用症提供了重要依据。 课题实验设计能够从临床实际出发，以已经用于临床，并证明安全、无毒副作用的川芎嗪注射液作为肿瘤细胞多药耐药逆转剂试用于临床，预期成果解决了现有肿瘤细胞多药耐药逆转剂较少投入临床应用和/或距临床实际应用相差甚远的关键难题。同时，这种大胆的设想和创新性研究拓宽了肿瘤细胞多药耐药研究领域，将可能成为提高肿瘤临床疗效的重要理论依据。本研究设计思路新颖，方案合理、可行，选用指标先进，具有明确的针对性。这一研究成果对于解决肿瘤细胞多药耐药性具有重要理论与临床应用价值。 在本课题研究过程中，通过课题组努力，在学术发展、带动辐射、人才培养、团队精神、学科建设以及科研思路方面取得明显进步，并在增加医院收入方面发挥了一定的作用。可以认为，本项研究获得了初步的社会与经济效益。预计，通过学术论文的发表与交流，将会带来更大的社会与经济效益。 项目4：乌头碱抗耐药性人上皮癌细胞的分子机制研究 “乌头碱抗耐药性人鳞状上皮癌细胞分子机制研究”为高等学校博士学科点专项科研基金资助课题（项目编号：20020026009）。该项目于2003年01月-2005年09月完成。经教育部科技司组织的专家鉴定，参加鉴定的专家有：中国中医科学院广安门医院林洪生主任医师担任主任委员，中国人民解放军北京军区总医院刘端祺主任医师担任副主任委员，中国中医科学院中药研究所叶祖光研究员、北京大学肿瘤研究所（北京肿瘤医院）李萍萍教授与朱军教授、中国医学科学院肿瘤医院徐兵河主任医师、卫生部中日友好医院郝迎旭主任医师担任委员。该课题得到了鉴定专家的一致好评。具体鉴定意见如下： 2006年3月1日，教育部在北京主持并组织召开了由北京中医药大学完成的“乌头碱抗耐药性人鳞状上皮癌细胞分子机制研究”的项目鉴定会。经鉴定委员会专家充分质疑、讨论，形成鉴定意见如下：①项目提供资料真实、齐全，符合鉴定要求；②课题从文献综述、体外细胞培养与作用机理探讨三方面进行了乌头碱抗耐药性人口腔鳞癌细胞分子机制研究。初步的实验研究结果显示：12.5μg/ml与6.25μg/ml浓度的乌头碱与VCR伍用时，IC50分别为0.2715μg/ml与0.9185μg/ml，逆转倍数分别为8.90倍与2.64倍。表明乌头碱具有一定的逆转肿瘤细胞耐药活性；流式细胞仪、免疫组化两种实验方法均证明，降低肿瘤细胞Pgp蛋白表达是乌头碱逆转耐药主要机制之一；基因芯片技术研究结果显示，整张基因芯片5504个基因克隆，其中用药前高表达基因208个，占克隆总数的3.8%，用药后高表达基因196个，占3.6%。用药前后细胞凋亡相关基因、CDKS家族、SMADS家族、MAPK信号转导系统等的基因发生变化。认为乌头碱可能通过影响细胞凋亡相关基因和影响MAPK信号转导系统等机制，最后作用于MDR1基因的表达，从而起到逆转耐药作用。③课题创新点在于：“在寒凝血脉与温阳散结”等中医理论指导下，首次证明具有“温阳散寒”功效的中药乌头主要成分乌头碱具有逆转人口腔鳞癌细胞耐药活性。为选择同类功效中药逆转肿瘤细胞多药耐药研究提供了有益的帮助。④选题新颖，实验设计合理，技术路线清晰，研究目的明确，技术指标具有一定的说服力，数据真实，结论可信。 综上所述，该项成果具有深入的理论探讨价值与进一步研究的可行性。已基本达到国内先进水平。鉴定委员会一致同意通过鉴定。 项目5：薯蓣皂甙抗乳腺癌作用的细胞分子机制研究 “薯蓣皂苷抗乳腺癌作用的细胞分子机制研究”为国家自然科学基金委员会面上资助项目（项目编号：30271670）。该项目于2003年01月正式启动，于2005年09月完成。在项目进展过程中已经获得国家专利。同时，经教育部科技司组织的专家鉴定，参加鉴定的专家有：中国中医科学院广安门医院林洪生主任医师担任主任委员，中国人民解放军北京军区总医院刘端祺主任医师担任副主任委员，中国中医科学院中药研究所叶祖光研究员、北京大学肿瘤研究所（北京肿瘤医院）李萍萍教授与朱军教授、中国医学科学院肿瘤医院徐兵河主任医师、卫生部中日友好医院郝迎旭主任医师担任委员。该课题得到了鉴定专家的一致好评。具体鉴定意见如下： 2006年3月1日，教育部在北京主持并组织召开了由北京中医药大学完成的“薯蓣皂苷抗乳腺癌作用的细胞分子机制研究”的项目鉴定会。经鉴定委员会专家充分质疑、讨论，形成鉴定意见如下：①项目提供资料真实、齐全，符合鉴定要求；②项目从文献综述、体外细胞培养、动物抑瘤实验与机理探讨四方面对穿山龙主要活性成分薯蓣皂苷抗肿瘤（乳腺癌）效应机制进行了系统研究。主要研究结果如下：体外细胞培养发现，穿山龙提取物及其活性成分薯蓣皂苷对包括白血病在内的多系肿瘤细胞均有明显的抑制效应，其中，对HL60、K562、A549、KB、Smmc、MCF-7细胞的抑制效果最好；动物实验证明，薯蓣皂苷不同剂量、不同给药途径均能够抑制小鼠移植性乳腺癌（MCF-7）生长，肿瘤抑制率分别为39.46%（腹腔注射）、38.24%与35.85%（不同剂量灌胃），已达到中药抗肿瘤药效学实验要求，以腹腔注射抑瘤效果最佳；薯蓣皂苷抗乳腺癌作用机理除直接抑制肿瘤细胞生长外，与其调节细胞周期、诱导细胞凋亡、影响包括癌基因、抑癌基因在内的多基因表达有关。③课题创新点在于：在国内首次发现活血化痰的单味中药穿山龙主要活性成分薯蓣皂苷具有抗肿瘤（乳腺癌）新用途。其药物主治功效能够针对乳腺癌中医主要病机治疗，体现了中医辨证论治的基本原则。依据研究结果，“穿山龙及其主要活性成分新用途”于2005年由国家知识产权局授权获得专利证书。④该项研究选题依据充分、新颖，整体设计思路清晰，研究目的明确，技术路线可行，观察指标先进，实验数据可信，结论可靠。其研究成果为穿山龙主要活性成分薯蓣皂苷抗肿瘤新药研发奠定了良好的前期基础。该项研究达到国内领先水平。鉴定委员会一致同意通过鉴定。 项目6：复方浙贝颗粒逆转白血病多药耐药临床研究 该项目为首都医学发展基金联合项目（项目编号：Ⅰ-1）。项目研究简介如下：急性白血病是一种病情重、进展快、死亡率高的血液系统恶性肿瘤。流行病学调查显示，白血病约占癌症总发病率的5％，成人癌症的2％，儿童癌症的30％以上，且近年来发病率有增高趋势，其中，急性白血病所占比例增加尤其明显。造血干细胞移植是急性白血病最好的治疗方法，但其具体实施受诸多条件所限，且移植后合并症多、早期死亡率高，且根据国内具体情况短期内难以普及。所以，联合化疗仍是当前的主体治疗方案。用蒽环类和阿糖胞苷可使成人急性髓系白血病（AML）60％～80％完全缓解（CR）；用长春新碱和泼尼松辅以蒽环类和环磷酰胺可使急性淋巴细胞白血病（ALL）80％以上CR。应用大剂量阿糖胞苷在内的巩固维持强化的缓解后治疗可使成人急性白血病患者5年无病生存率（DFS）达20％～60％，但还有30％左右难治；CR后60％左右最终复发而不治，甚至造血干细胞移植后仍可复发，这部分病例归属于难治性白血病范围。 难治性急性白血病对治疗反应差，诱导缓解率低，复发率高，生存期短，因而是白血病治疗中的难题。其主要原因在于，白血病细胞在接受化疗过程中对多种化学结构和作用机制完全不同的化疗药物同时产生多药耐药（MDR）。大量研究表明，MDR阳性组CR率仅为21.05％，而MDR阴性组CR率达66.67％。近年来在我国，白血病多药耐药问题使其与临床治疗相关的医疗成本明显增加，这给人民的生命财产和国家的经济发展造成了重大损失。且随白血病发病率的迅速升高，这种损失将会日趋增长。 自上世纪80年代初，欧美国家及日本先后投入近百亿美元进行白血病耐药机制及其耐药逆转剂的研究。目前研究证实，MDR的发生机制主要包括：①存在于肿瘤细胞膜上的P糖蛋白（Pgp）、多药耐药性相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、肺耐药相关蛋白（LRP）异常表达。②磷酸激酶C（PKC）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）、谷胱甘肽（GSH）与谷胱甘肽-S-转移酶（GST）等细胞内酶异常改变。此外，胸苷合成酶(TS)、醛脱氢酶(ALDH)的增加以及二氢叶酸还原酶(DHFR)的变异也可导致细胞耐药性的发生。③细胞凋亡(Apoptosis)基因与细胞因子改变。④DNA修复异常。⑤器官微环境及其他因素等。随着白血病耐药机制的不断阐明，国际医药大公司纷纷瞄准这一巨大的潜在市场，与大型科研机构联手，投入巨资开发白血病耐药逆转剂。先后发现的白血病耐药逆转剂包括PSC-833（Sandoz公司）、GF120918（Glaxo公司）、S9788（Servier公司）、右旋异搏定（Knoll公司）、Dexniguldipine（Byk Gulden公司）和MS-209（日本）等等。但是，这些药物由于脏器毒性过大和作用靶点单一，使临床应用受到了限制。目前尚没有一种难治性急性白血病多药耐药逆转剂获准上市。因此，寻找高效低毒、作用靶点广泛、且价格合理的耐药逆转剂是目前治疗急性白血病急需解决的迫切问题。 中医药是我国的宝贵财富，在几千年临床实践中为保障中华民族繁衍与昌盛发挥了至关重要的作用。长期临床实践证明，中药配合化疗治疗白血病，能够明显改善患者临床症状，提高缓解率与生存质量，延长生存期。其治疗机理除与中药对白血病患者机体进行综合调理，提高其免疫功能，有效杀伤白血病细胞，诱导白血病细胞分化与凋亡有关外，也与其能够逆转MDR有密切关系。近些年来文献报告已经证实，许多中药具有逆转MDR生物活性成分，川芎嗪、浙贝母碱、汉防己甲素、人参皂甙、雄黄、榄香烯以及某些中药复方体外逆转MDR效应进一步说明，中药在提高难治性白血病临床疗效方面具有潜在的临床应用前景和商业开发价值，值得进行深入研究。 按中医理论分析，通过临床实践发现，白血病患者早期多见有痰核、瘰疬等临床表现，我们认为其与“痰”关系极为密切。难治性急性白血病患者之所以发生多药耐药，其关键之一是痰气郁结，聚而不散的病理结果。复方浙贝母颗粒为北京中医药大学东直门医院肿瘤血液科依据国内外相关文献，结合既往临床应用基础性研究成果拟定的逆转白血病多药耐药方剂，处方由浙贝母、防己、川芎组成。根据处方中单味药物功效，本方具有“活血化痰”主治功能。将其应用于难治性白血病的治疗恰恰体现了中医药辨证论治、理法方药的理论。通过分别对处方中单味中药基础性研究证明，该方中单味中药提取物对多种肿瘤细胞耐药性具有逆转效应。为将基础性研究成果应用于临床，课题组对复方浙贝母颗粒进行了预临床研究，结果发现该方能够提高耐药白血病临床疗效，下调Pgp基因蛋白表达，并未发现明显的毒副作用。基于上述，我们采用复方浙贝母颗粒饮片，以难治性急性白血病患者为研究对象，按国家药品监督管理局的药品临床试验管理规范（GCP）标准统一制定临床研究方案与病例观察表（CRF）；以临床缓解率为主要评价指标，并拟订统一疗效评估标准，进行了随机双盲、多个研究单位的系统病例对照临床研究。 该课题以“复方浙贝母颗粒”为治疗药物，以“麦芽颗粒”为对照药物，以难治性急性白血病患者为研究对象，以临床缓解率为主要评价指标，并拟定统一疗效评估标准，进行复方浙贝母颗粒干预围化疗期难治性急性白血病临床疗效及逆转白血病多药耐药的规范化临床研究。全部病例资料来自12家三级甲等医院于2004年1月至2006年4月间所观察的135例难治性急性白血病患者。进入统计的病例共126例，治疗组65例，对照组61例。 研究结果表明：①按急性白血病临床疗效评定标准，治疗组完全缓解29例，占44.6％；部分缓解23例，占35.4％；未缓解13例，占20.0％；总有效率为80％。对照组完全缓解15例，占24.6％；部分缓解17例，占27.9％；未缓解29例，占47.5％；总有效率为52.5％。两组总有效率比较，具有统计学意义，P＜0.01，治疗组明显优于对照组。②骨髓白血病细胞百分比治疗前后相比，治疗组和对照组均具有统计学意义，P＜0.01。治疗后骨髓白血病细胞百分比两组间比较具有统计学意义，P＜0.01，治疗组明显低于对照组，即治疗组骨髓白血病细胞百分比下降幅度大。③入组时，治疗组和对照组病例白细胞计数比较，具有统计学意义，P＜0.05，治疗组白细胞计数明显高于对照组，治疗组中高白细胞性白血病（WBC＞100×109/L）病例比例较高,占21.5％，对照组中高白细胞性白血病病例比例仅占6.6％。治疗第2周及1疗程时，白细胞计数与治疗前比较，治疗组和对照组均明显下降，具有统计学意义，P＜0.01。治疗后白细胞计数两组间比较，无统计学意义，P＞0.05。④治疗后血红蛋白值、红细胞计数、血小板计数两组间比较，均无统计学意义，P＞0.05。⑤对于难治性AML患者，治疗组的疗效优于对照组；病程＜6个月的难治性急性白血病患者疗效最好；对于男性AL患者，治疗组的疗效优于对照组。⑥治疗组仅1例（1.52％）判断为可能与受试药物有关的不良反应，表现为恶心呕吐，但并不影响治疗。 结论：复方浙贝母颗粒配合化疗应用可增强化疗药物对白血病细胞的杀伤作用，明显提高难治性急性白血病的临床缓解率，并不增加化疗药物对骨髓的抑制作用，临床使用中未发现其对尿常规、便常规、肝肾功能和心电图等安全性指标有不良影响，具有较好的临床安全性，应进一步进行深入研究。